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犬的输血疗法在临床中的应用
2014-10-10 10:57  

 

文章来源:枫桥夜泊博客

输血疗法在人医的临床中已被广泛应用,时间可被追溯到上世纪。九十年代早期,国内有学者和科学试验机构将输血疗法应用于宠物临床,取得了成功,并有不少相关的文献报道和资料。

北京数家有规模、有实力的小动物医疗机构联合体从2004年开始试验和研究狗的输血疗法并应用于临床,积累了不少经验,取得了显著成效。

笔者谨将自己的一点心得和体会与同行共享,以期抛砖引玉。文章难免有疏漏之处,恳请同行一一指正。

一、犬的血型分类

关于狗的血型,几十年国内外学术界一直颇有争议。目前国际上比较公认的犬血型是7种。具体是:CEA-1(A1)、CEA-2(A2)、CEA-3(B)、CEA-4(C)、CEA-5(D)、CEA-6(E)、CEA-7(F)、 CEA-8(G)八种。

其中CEA-1和CEA-2相当于以前的A1和A2抗原。而A因子的抗原性最强,它是临床输血中最容易引发反应的因素。最为常见的是溶血反应。

二、输血疗法的适应症

严格地讲,狗的循环血液量和体液量下降,都可以输血。在临床上,如不明原因的大出血、休克、创伤、严重贫血(再生障碍性贫血,营养不良性贫血,)、白细胞和血小板减少、凝血不良、低蛋白血症、恶病质状态、败血症、白血病、长期消耗,如犬瘟热、细小病毒病、寄生虫(球虫、钩口线虫)的感染等,输血疗法都可以作为首选。

临床上,我们把血细胞比容作为衡量输血必要与否的一个理论指标。当红细胞比容低于0.2时,可考虑输血。

输血可以迅速地补充循环血容量和体液总量,维持一定的血压。增强血液的携氧能力,增加蛋白质的浓度和血液的凝固性,刺激机体的造血机能。同时,输血增加了白细胞的代偿能力,给机体提供了三天左右的缓冲时间。(红细胞进入受血动物体内约存活100天后被机体代谢;白细胞在机体内只能存活3天左右。)而大量补充的其它免疫因子将长期存在。目前,临床广泛应用的犬用球蛋白、白蛋白,实际上就是一种输血疗法(成份输血)。它通过一定的实验室技术,有选择性地补充了血液的某些成份,增加了机体的特异性或非特异性抗病能力,同时比输血更加安全。减少了输血反应,但临床效果不如输全血。没有条件的医院可以考虑选择。

三、输血疗法的禁忌症

患犬有严重的心脏疾病、肺水肿、肺气肿、急性肾炎、脑部疾病、白血病等,应严禁输血。犬的红细胞比容低于0.15时,输血后也可能预后不良。临床上禁用混合血。

四、血液的来源

1.实验动物中心提供。

2.自备血源。

临床输血往往时间紧迫,自备血原及时简单,能在第一时间为抢救小动物生命争取宝贵机会。自备血液需要解决供血犬的问题。供血犬建议选择年龄在1-2岁,体质较好,免疫完全,同时性情温驯、无攻击性的狗。体重应该在15-20公斤以上。最好是比格犬、灵缇犬、德国牧羊犬等。

五、采血的方法

1.采血量:不超过22毫升/公斤。每3—4周采血一次,不要过勤,以保证犬血的质量。

2.采血方法:用装有抗凝剂的血袋直接颈静脉采血。血袋一般是200毫升规格,内装抗凝剂28毫升。医院可根据实际情况对抗凝剂进行调整,以决定采血量。

3.采血时尽量让供血犬保持安静,最好把狗放在一个较高的位置,血袋略低,置于一电子称上,以借重力让血液缓慢地流入到血袋内。边采血边轻轻摇晃血袋,使血液与抗凝剂均匀混合,防止血液凝固。当血液量达到预期的称重时,停止采血。迅速封闭血袋的采血连接管以确保无菌。

4.备用的血液应置于4℃冰箱保存,忌冷冻。理论上可保存3周。在临床上我们一般超过10天以后就弃用。

六、犬的交叉配血试验

交叉配血试验是狗输血之前一个比较关键的步骤。最常用的是用供血犬的红细胞泥与受血犬的血清相结合,借以判断其凝集情况。

国内外学者大多认为狗的第一输血,不做交叉配血试验也是安全的,但有一定的过敏率。 我们认为除非在特别紧急的情况下,能做交叉配血试验的应该尽量做,以严格程序、确保受血犬的安全,同时减少医患纠纷。

交叉配血试验的具体操作方法如下:

1.基本原理:用供血犬的红细胞泥与受血犬和血清相结合,借以判断其凝集情况。具体操作是取供血犬的5% 红细胞悬液与受血犬血清在主侧池反应;用供血犬的血清与受血犬的5%红细胞悬液在次侧池反应。(注意:在临床上,由于使用一次性标准血袋的缘故,无法做次侧池凝集反应。因为全血内已混合了抗凝剂。)

2.制作供血犬的5%红细胞悬液:

① 取供血犬的全血2毫升,加入0.2毫升抗凝剂(10%枸橼酸钠与全血的比例为1:9),手弹试管,混合均匀后置于天平上称重(使用同样的试管内加入生理盐水直至平衡),后置于离心机内,1500转/分钟,离心5分钟。取上清液(血浆)于另一试管中备用。(抗凝剂也可以选用草酸盐。0.1毫升可抗凝2.5毫升全血。)

② 试管内剩余的红细胞加8-10倍生理盐水颠倒混匀称重离心,再取上清液于另一试管中备用。如此洗涤三次,分离后成分为红细胞泥。

③ 取已分离成功的红细胞泥0.2毫升加生理盐水3.8毫升,颠倒混匀数次即为5%的红细胞悬液。

3.制备受血犬的血清:

取受血犬的全血2毫升,称重离心。1500转/分钟,离心5分钟。取上清液置于另一试管中,再用该血浆称重离心,同样1500转/分钟,离心5分钟。取上清液于另一试管中备用,受血犬的血清即制备完成。此时的血清因不含纤维蛋白,故可用于交叉配血试验。

4.凝集反应的判定:

取供血犬5%红细胞悬液0.2毫升,滴于载玻片正中央。随后加入受血犬血清0.1毫升,用细大头针搅拌10余圈,于20—25℃的室温下静置20—30分钟。显微镜下观察凝集情况。

正常情况下,红细胞遍布于整个视野,排列均匀,无结团、无凝集、无异常形态。此时可输血。如发现有异常的红细胞,有结团、成串、混乱排列等形态,应坚决不予输血,以免发生危险。

5.考虑到临床个别病例紧急,为了争取时间,缩短交叉配血试验的过程,我们总结了一个简单易行的办法:取供血犬5%红细胞悬液0.2毫升加入受血犬血清0.1毫升,置于试管中,天平称平后,离心机1500转/分钟,离心5分钟。肉眼观察,手弹试管,注意有无红细胞结团现象即可。

七、输血量:

一般根据病情而论。经验值是:一次输血的量不要超过受血犬全血量的25%左右为宜(犬全血量红约占总体重的8%)。如一只10公斤的西施犬,输血量应为10×0.25×0.08=0.2公斤(200毫升)。临床上我们按20—22毫升/公斤体重输血。最大输血量约400—500毫升(受供血犬血源的限制)。效果良好。忌输混合血源!

八、输血方法:血袋连接输血器直接静脉滴注。如没有输血器,也可用输液器替代。但是得注意头皮针的大小。建议使用7.5号或更大号针头,否则容易堵塞针头,导致输血不畅。

九、输血注意事项:

1.输血前血源应加热致常温。把血袋浸入37℃左右的温水中,直至温热。

2.如输血时间过长,因血袋长时间静止倒置,血细胞容易下沉。建议每隔一段时间,应轻轻摇晃血袋几次。

3.输血前用0.9%氯化钠溶液30—50毫升,视受血犬体重加入一定量的地塞米松、维生素C、10%葡萄糖酸钙等,缓慢静脉滴注,以减轻输血反应。效果较好。

4.刚刚输血时的一段时间相当关键。医护人员应严密监护受血犬的生命体征。主要是观察患犬呼吸频率、心跳、精神状态、体表是否震颤、有无异常反应等。如有异常,应告知医生并作相应处理,必要时立即停止输血。

5.输血的速度一定要慢。应根据患犬的个体状况灵活掌握。小狗,恶病质犬、老年犬,心脏功能不好的犬、高度贫血的犬、有细小病毒心肌炎倾向的狗,都应该慢输。

6.输血作为一种治疗方法,能有效提高患犬的康复机率。但输入的血液并不是万能药。所以后续的药物治疗不可或缺。

十、输血反应

引起输血反应的原因除血型不适合外,还可能有病原体的输入。常见的巴贝斯焦虫、巴尔通氏体、埃利希氏体、传染性肝炎病毒、CDV、以及血液保存过程中细菌和真菌的增殖等。输血反应发生后,临床主要感观表现为患犬精神烦躁、不安或兴奋,呼吸急促或困难。进而出现眼周潮红、充血、眼睑浮肿、全身肌肉或眼球震颤、搔痒。严重者呕吐、流涎、大小便失禁、血红蛋白尿、黄疸、虚脱和休克。

主要反应如下:

1.溶血反应。

2.过敏反应。

3.增加肝脏负担。

4.输血过快或过量导致急性充血性心力衰竭、肺水肿。

十一、输血反应的对症治疗

发现输血反应的症状及变化后应立即停止输血。同时氨茶碱10毫克/公斤,肌肉注射或静滴;地塞米松2—4毫克/公斤,静脉注射。为了防止肾功能障碍及心肺并发症,早期可静脉注射速尿。呼吸困难者可适量使用尼可刹米。

十二、输血的后期问题及解决办法

主要是肝脏的负担问题。输血后一定要输入一定量的葡萄糖、VC和保护肝脏药物如肝泰乐、促肝细胞生成因子等。最好连续使用三四天。因为大量的红细胞输入体内以后,携带了相当量的血红蛋白。受血动物要将血红蛋白中的二价铁离子转化为三价铁离子,这个过程产生了大量的直接胆红素。它与肝脏中的葡萄糖结合形成脂型胆红素排出。输血量越大肝脏的负担越大。这种情况在临床上很常见。好多患犬输血之后的数小时状态很好。可是过一晚之后却出现精神沉郁,排血红蛋白尿,黃疸等症状,且能持续数天。实际上就是这个原因。

十三、小结与体会

输血疗法作为一种新的治疗方法与手段,正在被越来越多的医院与医师接受。我们注意到它的高效与实用,但也不能忽视它的反应。从2004年开始,我们把输血疗法广泛应用于临床。总结后发现,对于细小病毒、寄生虫、败血症、长期的消耗和感染、各种贫血,以及外科手术中以及术后的出血等,效果明显;对于犬瘟热,不同阶段效果不明。感染早期,无肺部症状时,效果尚可;有严重的呼吸道症状,后期神经症状出现时,疗效不明朗。对比总体效果不如细小病毒等。

 

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